蛙心灌流实验

实验目的：

1、学习斯氏或八木氏离体蛙心灌流法。

2、了解心肌的生理特性。

3、观察 Na+、K+、Ca2+及肾上腺素（Adr）、乙酰胆碱（Ach）等对离体心脏活动的影响。

实验原理：

动物的离体心脏，用理化特性类似于其血浆的代体液灌流时，在一定的时间内，仍然保 持有节律的舒张活动。改变灌流液的理化特性，这种节律的舒缩活动也随之发生改变，说明 内环境理化因素的相对恒定是维持心脏正常节律活动的必要条件.

实验材料与用品：

1、材料：蟾蜍、斯氏蛙心套管、套管夹、支架、双凹夹、蛙心夹、蛙板（蜡盘）、常用手术 器械、滴管、废液缸、棉线

2、药品：任氏液、0.65%NaCl、2%CaCl2 、1%KCl、0.01% 肾上腺素、0.01%乙酰胆碱

3、仪器：计算机采集系统、张力传感器

实验步骤：

1、取一只蟾蜍，用探针破坏其脑脊髓后仰卧固定于蛙板上，剪开胸前区皮肤，剪去胸骨， 暴露心脏。用眼科镊提起心包膜，再用眼科剪在心脏收缩时将其剪破，使心脏完全暴露出来。

2、识别心脏的各个部分，包括心房、心室、静脉窦等，并观察心跳。

3、插蛙心插管，制备离体蛙心。在左主动脉下穿一线结扎，靠近动脉窦，接着在左右主动 脉下方穿一线，并打一松结留作固定插管用。

4、用手提起结扎线，用眼科剪在左侧主动脉距分叉 3mm 处向心脏剪一斜口，右手将盛有 少量任氏液的蛙心插管由此口插入，先进入动脉圆锥，然后在心室收缩时，向前略向左推动 蛙心插管，使之经主动脉瓣插入心室腔内（注意：为了使蛙心插管顺利插入心室，应使心室 与动脉圆锥成一条直线）。进入心室的标志是随着心室搏动，均有血液喷入插管，插管的液 面随着心搏而升降。结扎插管并将结扎线固定于插管侧面的小钩上，以防止标本滑脱。在蛙 心插管插入心室后，用吸管及时吸出管内的血液，更换新鲜任氏液。提起插管，剪断主动脉 左、右侧分支，轻轻提起插管和心脏，在静脉窦下方绕一线，将左右肺静脉及前后腔静脉一 起结扎（切勿损伤静脉窦），在结扎线下方剪去所有牵连的组织，将心脏摘出。用任氏液反 复冲洗（10~25 滴/min 的速度缓慢点滴）任氏液。至插管内任氏液完全澄清无色为止。以后 做实验注意每次换液时，插管内液面应保持相同的高度。

5、连接多道生理记录仪

①用夹子将蛙心插管固定于铁架台上，肌张力换能器固定于蛙心下方，通过蛙心夹与线将离 体蛙心与张力换能器相连（蛙心夹于心室舒张时夹住心尖）。

②开动多道生理记录仪观察曲线。

6、观察内容

①描记正常心搏曲线： 曲线疏密——代表心跳的频率; 曲线的规律性——代表心跳节律性； 曲线的幅度——代表心室收缩的强弱 曲线的顶点水平——代表心室收缩的程度； 曲线的基线——代表心室舒张的程度。

②加入 2%Ca Cl2 溶液 1~2 滴，混匀，观察曲线变化。

③加入 1%KCl 溶液 1~2 滴，混匀，观察曲线变化。

④加入 1/10000Ad 溶液 1~2 滴，混匀，观察曲线变化，待效应明显后，将灌流液全部吸出， 换入新鲜任氏液，使心跳恢复正常。

⑤加入 1/100000Ach 溶液 1~2 滴，混匀，观察曲线变化，待效应明显后，将灌流液全部吸出， 换入新鲜任氏液（如果加入 Ach 后心跳已停止舒张状态，换液后，可用滴管插至插管底部， 将灌流液剂入心室，反复数次，将心室内 Ach 完全清洗出）。

注意事项：

1、用眼科镊提起心包膜，再用眼科剪在心脏收缩时将其剪破，使心脏完全暴露出来。

2、未结扎剪断血管会造成大出血，是严重错误操作；未结扎便插入插管同理。

3、为了使蛙心插管顺利插入心室，应使心室与动脉圆锥成一条直线。

4、进入心室的标志是随着心室搏动，均有血液喷入插管

5、在蛙心插管插入心室后，用吸管及时吸出管内的血液，更换新鲜任氏液

在现实实验中，操作如此的实验失败率高，采用虚拟仿真技术更能直观的让学生了解到该实验的过程，可是虚拟仿真技术选什么好呢？认准“红平果”软件就是您最佳的选择，“红平果”软件是河南恒茂创远科技股份有限公司旗下品牌，主要产品包括机能学虚拟仿真教学实验平台、超高清显微形态虚拟仿真教学系统、中西医结合临床思维实训系统、三维人体解剖系统、影像诊断实训系统、护理三维实训系统等。